换一批TrkA-脂筏@琼脂糖凝胶色谱模型的构建及亲和行为研究
Construction of TrkA-lipid rafts@CNBr-Sepharose 4B gels chromatography and its affinity behavior
摘要目的:构建原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)-脂筏@琼脂糖凝胶生物亲和色谱模型,并初步应用于TrkA靶向药的亲和吸附及稳定性研究.方法:通过溴化氰固定配体的偶联反应制备TrkA-脂筏@琼脂糖凝胶固定相并表征,30 d内重复上样实验考查其稳定性.亲和吸附实验考查TrkA靶向药在空白琼脂糖凝胶柱和TrkA-脂筏@琼脂糖凝胶柱上的亲和吸附行为.结果:蛋白免疫印迹结果显示,脂筏含有浮舰蛋白(Flotillin-1)、小窝蛋白(Caveolin-1)及TrkA蛋白.将U251 细胞脂筏与琼脂糖凝胶偶联后,经过多倍柱体积缓冲液冲洗,脂筏仍能在柱床上实现较稳定的固载.吸附实验证明TrkA-脂筏@琼脂糖凝胶固定相具有特异性亲和吸附作用.结论:成功构建了TrkA-脂筏@琼脂糖凝胶生物亲和色谱模型,初步验证该模型的可行性与稳定性.
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分类号
R914（药物基础科学）
栏目名称
DOI
10.13312/j.issn.1671-7783.y240113
发布时间
2025-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81673574;SH2023062）
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