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重组融合蛋白早期快速诊断侵袭性念珠菌病的实验研究

Research on recombinant fusion protein in early fast diagnosis of invasive candidiasis

摘要目的 建立一种IC早期快速准确的诊断方法.方法 178例临床需要送检侵袭性念珠菌病常规检测和真菌培养的患者血清为研究对象,其中103例确诊为侵袭性念珠菌病者作为病例组,75例为在同样免疫妥协易感人群但无念珠菌感染微生物学证据的患者血清作为对照组.应用基因重组的方法,将念珠菌菌丝壁蛋白(HWP1),与位于细胞壁的糖酵解酶(烯醇化酶蛋白ENO1)进行基因克隆,随后将由HWP1与ENO1组成的重组蛋白在大肠杆菌中表达,并建立酶联免疫方法(ELISA),检测患者血清中的IgG特异性抗体.通过统计学的分析,计算出该方法的灵敏度,特异性,阳性预测值,阴性预测值.筛选出灵敏度高,特异性强,阳性预测值和阴性预测值均高的融合蛋白抗原建立的ELISA方法.结果 病例组中抗-ENO1、抗-HWP1以及二者联合检测的阳性检出率均显著高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义.抗-HWP1与抗-ENO1两方法相比,抗-HWP1的敏感性(x2=37.622,P<0.01)、阳预测值(x2=74.427,P<0.01)及阴性预测值(x2=2.057,P=0.152)均显著高于抗-ENO1;联合检测与抗-ENO1比较,敏感性(x2=44.524,P<0.01)、特异性(x2=9.765,P=0.002)及阳预测值(x2=72.000,P<0.01)均显著高于抗-ENO1;联合检测与抗-HWP1相比,特异性(x2=4.700,P=0.030)、阴性预测值(x2=3.191,P=0.074)显著高于抗-HWP1.结论 ENO1和HWP1蛋白重组后联合诊断的效果更佳,可以作为IC早期快速准确的诊断方法.

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