摘要目的 探讨微小RNA(miR)-34a对异氟烷麻醉引起的老年大鼠认知功能障碍的影响及其作用机制.方法 将40只20月龄大鼠随机分为正常(Con)组、模型(Model)组、miR-34a抑制剂(miR-34a inhibitor)组和miR-34a激动剂(miR-34a mimics)组,每组10只.miR-34a inhibitor组和miR-34a mimics组大鼠尾静脉注射100 nmol/kg对应药物,Con组和Model组大鼠尾静脉注射等剂量生理盐水,1次/d,连续5 d.第6天,除正常组外,其余组大鼠均进行单次异氟烷麻醉6 h,构建术后认知功能障碍(POCD)模型.建模完成后12 h,采用Morris水迷宫实验观察大鼠逃避潜伏期和目标象限停留时间.采用免疫荧光染色观察大鼠海马组织中离子钙结合衔接分子1(Iba-1)阳性表达率.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠海马组织中miR-34a以及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA相对表达量.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、活性氧(ROS)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平以及海马组织中谷氨酸(Glu)、Ca2+和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)含量.采用蛋白质印迹(Western blotting)检测大鼠海马组织中钙-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)、pCaMK Ⅱ、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(pCREB)蛋白相对表达量.结果 与Con组比较,Model组大鼠逃避潜伏期、血清中IL-6、IL-1β、ROS水平以及海马组织中Iba-1阳性表达率、miR-34a、Bax mRNA相对表达水平和Glu、Ca2+、NMDAR2B含量延长或升高,目标象限停留时间、血清中GSH-Px水平、海马组织中Bcl-2 mRNA相对表达水平、Bcl-2/Bax以及pCaMK Ⅱ/CaMK Ⅱ和PCREB/CREB缩短或降低,差异有统计学意义(P＜0.05).下调miR-34a表达可缩短模型大鼠逃避潜伏期,以及降低血清中IL-6、IL-1 β、ROS水平和海马组织中Iba-1阳性表达率、miR-34a、Bax mRNA相对表达水平和Glu、Ca2+、NMDAR2B含量(P＜0.05),还可延长目标象限停留时间,以及血清中GSH-Px水平、海马组织中Bcl-2 mRNA相对表达水平、Bcl-2/Bax以及pCaMK Ⅱ/CaMK Ⅱ和PCREB/CREB(P＜0.05).上调miR-34a表达可通过促进小胶质细胞的异常激活以及炎症、氧化应激和凋亡,抑制CaMK Ⅱ/CREB信号通路活化,加重模型大鼠认知障碍.结论 miR-34a在POCD老年大鼠中高表达,抑制miR-34a表达可通过激活CaMK Ⅱ/CREB信号通路改善老年大鼠因异氟烷麻醉引起的认知功能障碍.