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CXC趋化因子配体5通过激活Wnt/β-连环蛋白通路促进胃癌免疫逃逸及移植瘤生长的机制研究

Mechanism of CXC chemokine ligand 5 in promoting immune escape and transplanted tumor growth in gastric cancer via activating Wnt/β-catenin pathway

摘要目的 探讨CXC趋化因子配体5(CXCL5)通过Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对胃癌细胞小鼠移植瘤生长的影响.方法 选取70例胃癌(GC)患者(GC组)和70例健康人群(健康组)为研究对象,检测各组血清CXCL5水平,采用免疫组织化学染色法检测GC组织中CXCL5的阳性表达率,并分析CXCL5表达与临床病理特征的关系.将40只小鼠分为过表达CXCL5组和对照组,每组20只.取小鼠胃癌细胞株MFC,通过稳定过表达CXCL5和转染空载体建立小鼠移植瘤模型,记录各组小鼠移植瘤的生长情况及小鼠存活情况.采用流式细胞术检测小鼠移植瘤组织中CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、调节性T细胞(Treg细胞)比例;采用Western blot法检测小鼠移植瘤组织中CXCL5及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组小鼠移植瘤组织中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和原癌基因c-Myc(c-Myc)的mRNA表达.结果 GC组血清CXCL5水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05).GC组织中CXCL5阳性表达率为67.14%(47/70),高于癌旁组织中的CXCL5阳性表达率35.71%(25/70),差异有统计学意义(P<0.05).GC患者CXCL5阳性表达与阴性表达在肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移方面比较,差异有统计学意义(P<0.05).过表达CXCL5组小鼠存活率低于对照组,差异有统计学意义(P=0.048);随着时间延长,过表达CXCL5组小鼠肿瘤体积大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中CXCL5、Wnt1、Wnt2、β-catenin蛋白表达均高于对照组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05).过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中CD4+T细胞、CD8+T细胞比例低于对照组,Treg细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中Cyclin D1 mRNA 和 c-Myc mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GC患者癌组织和血清中CXCL5表达水平上调,CXCL5异常高表达可能激活Wnt/β-catenin信号通路影响肿瘤免疫活性,促进GC进展.

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