换一批
换一批摘要应用RT-PCR 方法从PEDV流行毒株中扩增COE基因，并将其克隆至原核表达载体pET -32a，构建pET-32a-COE重组质粒。将重组质粒转化至宿主菌BL21（DE3）中，加入IPTG进行诱导表达。 SDS-PAGE分析结果显示，该重组蛋白获得了表达，主要以包涵体形式存在，分子量约为35．5 ku；Western-blot分析结果显示，所表达的重组蛋白能与抗PEDV小鼠血清反应。应用纯化的重组蛋白加入弗氏佐剂免疫6周龄BALB／C小鼠并采集血清， ELISA检测抗体效价达1∶3200以上，说明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。
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