肠出血性大肠杆菌O157:H7 toxB基因的分片段克隆和表达
Cloning and expression of toxB gene in segments from enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7
摘要根据GenBank已有toxB基因全长序列,分别设计6对引物扩增toxB基因,克隆到质粒pGEX-4T-1,构建重组菌BL21(p1ys)(pGEX-4T-1-toxB),IPTG诱导表达重组蛋白质,用Western b1ot鉴定重组蛋白质免疫原性. toxB基因片段大小分别为1531 bp、1590 bp、1609 bp、1603 bp、1525 bp和1690 bp,重组蛋白质分子量分别为8.1×104、8.3×104、8.4×104、8.3×104、8.0×104和8.7×104.以兔源EHEC O157: H7抗血清为一抗,Western b1ot分析结果显示6个重组蛋白质均具有良好的免疫原性.
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