换一批丙型肝炎病毒T细胞表位的筛选及其在大肠杆菌中的克隆与表达
T-Cell antigenic epitopes of hepatitis C virus: selecting,cloning and expressing in E.coli
摘要目的:在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)不同变异株中,筛选高保守的能涵盖多种MH C限制类型的T细胞表位,并构建重组表位抗原的原核表达质粒.方法:检索文献并结合MHC限制型,从中遴选出功能明确的T细胞表位;利用Goldkey软件,建立H CV全长蛋白序列数据库;从中分别截取各个表位所在区段,对所选取的表位进行同源性比较 ;从中选取保守性强的部分表位,用化学法合成表位基因,插入原核表达载体pBVIL1中,构建多个融合表达质粒并在E.coli表达.结果:从文献中获得HCV 免疫优势性T细胞表位18个,在由55条全长HCV序列组成的数据库中进行比较,获得了大量有关表位保守性的信息,并进行了统计分析,所构建的5个表达质粒pBVIL1-T1～T5经鉴定后 , 在大肠杆菌中均获得了高效表达.结论:本研究有助于深入认识HCV T细胞表位的特性,为表位的筛选提供了方法学依据,所选取的表位及原核表达的重组蛋白 ,为HCV治疗性疫苗的实验研究提供了候选抗原.
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分类号
R512.6（传染病）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-9960.2003.02.009
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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