换一批CUL4A-DDB1细胞稳定株筛选及DNA双链断裂模型构建
Establishment of CUL4A /DDB1 stable expression cell strain and cell models responding to DNA damage
摘要目的 为了鉴定并验证CUL4A-DDB1泛素连接酶复合体中参与DNA损伤修复反应过程的1~2种关键成分在损伤识别、早期及晚期修复中的动态变化,拟构建含有串联亲和纯化(TAP)标签载体并筛选高表达CUL4A/ DDB1的细胞株,建立DNA双链断裂模型.方法 利用PCR获得CUL4A/DDB1基因,构建重组表达载体pNTAP-A-CUL4A/ DDB1;使用顺铂和电离辐射刺激等外界刺激建立合适的DNA双链断裂细胞模型,使用G418筛选稳定表达CUL4A/ DDB1的细胞株.结果 与结论 成功构建pNTAP-A-CUL4A/ DDB1表达载体,建立合适的DNA双链断裂细胞模型,筛选得到稳定表达CUL4A/ DDB1的细胞稳定株,为下一步质谱分析CUL4A-DDB1泛素连接酶在DNA损伤修复过程中的新功能打下基础.
更多相关知识
分类号
Q523（核酸）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-9960.2012.07.009
发布时间
2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重大科学研究计划（2007CB914601）
国家自然科学基金（31125010）
- 浏览310
- 被引1
- 下载9
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
