利用Mps1特异性siRNA抑制人宫颈癌HeLaS3细胞增殖的研究
Inhibitory effect of Mps1 specific siRNA on human cervical cancer HeLaS3 cell proliferation
摘要目的 验证所设计的Mps1小干扰RNA(siRNA)的特异性,为其应用于肿瘤治疗提供研究基础.方法 针对Mps1基因的5’端设计合成一个siRNA(简称为siMps1),利用Western印迹检测siMps1的干扰效果,以及干扰后对肿瘤细胞的增殖和有丝分裂的影响.进一步构建稳定表达siMps1的细胞系SW480-YFPMps1 siR/shRNA,检测过表达外源Mps1能否恢复其内源基因缺失的表型.结果 转染siMps1能够降低细胞中的Mps1蛋白水平,导致有丝分裂指数降低,染色体中期排列异常;进而通过克隆形成实验发现,HeLaS3细胞转染siMps1后大量死亡,出现多核细胞;构建的稳定细胞系SW480-YFPMps1 siR/shRNA能够恢复Mps1缺失后的表型.结论 该设计得到的siMps1具有很高特异性,有望应用于肿瘤的治疗中.
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