首页 > 军事医学 > 干扰EphA3的慢病毒lentivirus-1504的构建及其对肝癌细胞7402抑制作用研究

干扰EphA3的慢病毒lentivirus-1504的构建及其对肝癌细胞7402抑制作用研究

Construction of lentivirus-1504 interfering EphA3 expression and its inhibitory effect on growth and migration of liver cancer cell 7402

二维码有效期 120s

摘要目的构建携带干扰癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体,并研究其对肝癌细胞7402的生长和迁徙的影响.方法构建携带EphA3 siRNA的慢病毒载体质粒并将其与外源EphA3表达质粒共转染至人胚肾细胞293T中,Western 印迹检测其干扰EphA3蛋白表达的效果.将pSIH-H1-小发夹RNA(shRNA)-1504及空载体分别与3种包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒lentivirus-1504及对照慢病毒.将所获慢病毒分别感染肝癌细胞7402,并加入嘌呤霉素(puromycin)筛选,1周后将细胞收集.Western印迹检测EphA3蛋白的表达水平,然后分别应用MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验以及划痕实验检测敲低EphA3对肝癌细胞增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力的影响.结果 lentivirus-1504抑制了7402细胞EphA3的表达,敲低EphA3后抑制了7402细胞的增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力.结论慢病毒lentivirus-1504能够明显抑制肝癌细胞7402的生长能力、存活能力、恶性程度和迁移能力,提示EphA3可能是一个新的肝癌治疗靶点.

作者李海量 ^[1] 王洪涛 ^[2] 赵亚丽 ^[3] 罗国兰 ^[2] 张晓清 ^[2] 薛萌 ^[2] 潘耀振 ^[4] 周建光 ^[2] 学术成果认领

作者单位军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;贵阳医学院,贵阳,550004 ^[1] 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 ^[2] 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;贵阳医学院,贵阳,550004;航天医学工程研究所,北京,100193 ^[3] 贵阳医学院,贵阳,550004 ^[4]

关键词 EphA3 RNA,小分子干扰慢病毒感染癌基因癌,肝细胞 7402

医学主题词细胞(Cells)病毒(Viruses)肝肿瘤(Liver Neoplasms)才能(Aptitude)慢病毒属(Lentivirus)

分类号 R735.7（消化系肿瘤）

栏目名称

论著

DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.04.004

发布时间 2013-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（30770834,30870961）国家高技术研究发展计划（863计划）（2008AA02Z123）