换一批
换一批摘要目的 建立可行的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)基因无痕敲除方法.方法 PCR扩增得到目的基因上下游同源臂融合片段,将其克隆到自杀载体pKO3-km,构建重组质粒.提取重组质粒,通过电转化转入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,在43℃条件下培养筛选得到重组质粒整合到细菌基因组上的重组子,再利用质粒pKO3-km上的sacB基因在含蔗糖的平板上反向筛选得到突变株.结果与结论 成功构建突变株,且突变株基因组上没有任何抗性筛选标记残留.该研究为肺炎克雷伯菌基因功能研究提供了基因敲除技术.
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关键词
克雷伯菌,肺炎cAMP受体蛋白基因敲除自杀载体同源重组Klebsiella pneumoniaecAMP receptor proteingene knockoutsuicide vectorhomologous recombination
分类号
R378.1
栏目名称
论著
DOI
10.7644/j.issn.1674-9960.2013.06.010
发布时间
2013-08-13
基金项目
国家自然科学基金资助项目
重庆市科委自然科学基金资助项目
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