摘要目的 观察人PIF1解旋酶敲低对电离辐射致细胞生长及细胞周期阻滞的影响,以探讨人PIF1在电离辐射致DNA损伤应答中的作用.方法 采用慢病毒系统建立PIF1敲低稳转细胞系,实时荧光定量PCR及Western印迹检测PIF1敲低效果.细胞计数法观察PIF1敲低对4 Gy γ射线照射下细胞增殖的影响,流式细胞术观察PIF1敲低对8 Gy γ射线照射下细胞周期阻滞的影响.结果 建立了PIF1敲低的稳转细胞系,4 Gy γ射线照射后,PIF1敲低细胞系的生长受到明显抑制,在照后第2~4天几乎无任何增殖,直到第5天才开始缓慢增殖.8 Gy γ射线照射后,PIF1敲低细胞系的S期阻滞与G2/M期阻滞相对于对照细胞发生明显延迟.结论 PIF1敲低后显著增加了细胞的辐射敏感性以及电离辐射所致的S期阻滞与G2/M期阻滞延迟.
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