低氧对共培养体系中内皮细胞eNOS活性及平滑肌细胞增殖与迁移能力的影响
Effects of hypoxia on eNOS activity of endothelial cells and proliferation and migration of smooth muscle cells in a co-culture system
摘要目的 探讨在内皮细胞和平滑肌细胞共培养模型中,低氧对内皮细胞中eNOS活性,以及平滑肌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 利用人肺动脉内皮细胞(HPAEC)与人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)构建共培养模型,经过低氧(3%O2)或常氧(20%O2)处理后,通过CCK-8实验、Ki-67和EdU染色、Western印迹及Transwell小室迁移实验分别检测低氧对HPASMC增殖和迁移的影响;通过试剂盒和Western印迹分别检测低氧对NO释放量和eNOS活性的影响;进一步利用硝普钠(SNP)分解生成NO的特性验证HPAEC释放的NO在调节HPASMC增殖和迁移中的作用.结果 低氧能显著促进共培养模型中HPASMC的增殖与迁移能力,并抑制HPAEC中eNOS的活性和NO生成;然而,在HPAEC培养基中添加SNP则能明显逆转由低氧导致的HPASMC增殖与迁移.结论 低氧通过抑制共培养体系下HPAEC中eNOS的活性进而减少NO的生成和分泌,NO释放量的减少最终促进了HPASMC的增殖与迁移.
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