换一批摘要目的 确定稳定的内参基因以比较病毒感染下靶标基因的转录水平,为研究宿主-流感病毒相互作用提供参考.方法 在经典流感感染细胞模型(A549和THP-1细胞)中使用逆转录定量实时PCR(RT-qPCR)检测6个候选内参基因[甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、β-肌动蛋白(β-actin)、18S RNA、β2微球蛋白(B2M)、泛素结合酶E2D2(UBE2D2)、核糖体蛋白 L37A(RPL37A)]的相对表达量.使用 BestKeeper、GeNorm、NormFinder和比较 ΔCt 法等方法综合评估内参基因的稳定性.结果 在不同条件下,内参基因稳定性存在差异.当综合考虑流感病毒感染和免疫激活等因素时,β-actin和GAPDH分别是A549细胞和THP-1细胞中最稳定的内参基因,其次是UBE2D2和B2M.结论 鉴定出的A549和THP-1细胞在流感病毒感染、干扰素及脂多糖处理时表达内参基因的稳定性及优选内参基因,对病毒感染机制研究具有借鉴意义.
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关键词
内参基因流感病毒干扰素逆转录定量PCRA549细胞THP-1细胞reference geneinfluenza virusinterferonreverse transcription-quantitative PCRA549 cellTHP-1 cell
分类号
R183（流行病学与防疫）
栏目名称
DOI
10.7644/j.issn.1674-9960.2024.07.005
发布时间
2024-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
病原微生物生物安全国家重点实验室自主研究课题（SKLPBS2209）
病原微生物生物安全国家重点实验室自主研究课题（SKLPBS2120）
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