换一批红细胞载丁酰胆碱酯酶给药系统的制备及体外评价
Preparation and in vitro evaluation of an erythrocyte-based butyrylcholinesterase delivery system
摘要目的 制备一种以红细胞为载体的丁酰胆碱酯酶(BChE)递送系统,以实现对有机磷毒剂中毒的预防作用.方法 采用重组表达方法制备BChE,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法检测其聚体情况;使用改良的低渗预膨胀法制备载BChE红细胞载药系统;通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测载药量和包载率;利用活性检测试剂盒测定其体外催化能力;利用扫描电镜、流式细胞术、血细胞分析仪等对其进行表征评价.结果 重组表达制备的BChE以二聚体为主(二聚体占比约85％,单体占比约15％);经调整红细胞与低渗透液体的体积比,确定满足最适低渗透压的红细胞与低渗透液体的体积比为1∶7;与天然红细胞和空载红细胞比较,载BChE红细胞在体外具备显著的催化活性(P＜0.001);与天然红细胞比较,载BChE红细胞的平均细胞体积显著增加(P＜0.001),而细胞平均血红蛋白含量和每100 mL红细胞体积血红蛋白含量均显著降低(P＜0.001),但扫描电镜未显示明显差异(为双凹圆饼状);低渗包载过程可以在一定程度上促进红细胞的凋亡(P＜0.001),但与低渗组比较,载BChE红细胞的凋亡未显示出统计学差异(P＞0.05);与天然红细胞比较,载BChE红细胞的CD47表达无统计学差异(P＞0.05).结论 采用改良的低渗预膨胀法制备的载BChE红细胞载药系统,在保留红细胞基本特征的同时,具备了 BChE的催化能力,为后续有机磷毒剂中毒的临床干预提供了新选择.
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关键词
有机磷神经性毒剂载药红细胞丁酰胆碱酯酶低渗预膨胀技术organophosphorus nerve agentsdrug-loaded erythrocytesbutyrylcholinesterasehypotonic preswelling method
分类号
R943（药剂学）
栏目名称
DOI
10.7644/j.issn.1674-9960.2025.06.009
发布时间
2025-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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