基于RPA-CRISPR/Cas12a的食品中肉毒杆菌快速检测方法建立
RPA-CRISPR/Cas12a-based rapid detection of Clostridium botulinum in food
摘要目的 建立一种针对食品中肉毒杆菌的快速检测方法.方法 通过结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和CRISPR-Cas12a系统,针对肉毒杆菌特异性基因序列设计RPA引物和crRNA,并引入单链荧光探针,建立基于RPA-CRISPR/Cas12a快速检测肉毒杆菌的可视化方法,评估该方法的灵敏度、特异性并用于实际样品的检测.结果与结论 该方法可在1h内完成检测,检测限可达1.91拷贝/μL,且与其他常见食源性致病菌无交叉反应.所建立的RPA-CRISPR/Cas 12a肉毒杆菌快速检测方法具有高特异性、高灵敏性、操作简单等优点,有望为食源性致病菌的快速检测提供新的可行方案.
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