纤维连接蛋白1在胎儿生长受限的作用及其可能机制
Effect and underlying mechanism of fibronectin 1 on fetal growth restriction
摘要目的 探讨纤维连接蛋白1(FN1)在胎儿生长受限(FGR)的作用及其可能机制.方法 采用Western blot和实时荧光定量PCR检测15例FGR胎盘组织、15例正常胎盘组织中FN1蛋白和mRNA表达,免疫组织化学染色检测FN1阳性表达率.分别用FN1敲除慢病毒(Si-FN1组)和空载体慢病毒(Si-NC组)感染滋养细胞株HTR-8,采用流式细胞术、Western blot及实时荧光定量PCR验证FN1敲除效率,流式细胞术检测HTR-8细胞周期和凋亡,CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖和迁移率,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移数量,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和Akt蛋白表达,并对HTR-8细胞进行RNA转录组测序分析.结果 与正常胎盘组织相比,FGR胎盘组织中FN1蛋白和mRNA表达、阳性表达率均降低(P<0.05或P<0.01).与Si-NC组相比,Si-FN1组HTR-8细胞中FN1蛋白和mRNA表达降低,细胞增殖、迁移和侵袭减少(P<0.05或P<0.01);Si-NC组与Si-FN1组细胞周期和细胞凋亡率比较无统计学差异(P>0.05).KEGG通路富集分析提示PI3K/Akt信号通路可能是FN1调节HTR-8细胞增殖、迁移和侵袭的关键通路.Si-FN1组磷酸化PI3K和磷酸化Akt蛋白表达低于Si-NC组(P<0.05).结论 FN1低表达于FGR胎盘组织;敲低FN1表达可能通过抑制PI3K/Akt信号通路,减少滋养细胞的增殖、侵袭和迁移.
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