斑玉蕈Hypsizygus marmoreus凝集素的部分性质和细胞凝集活性分析
Partial properties and haemagglutination activity analysis of the lectin from Hypsizygus marmoreus
摘要斑玉蕈子实体经生理盐水抽提、30%~60%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose和Sephadex G-100柱层析纯化得到斑玉蕈凝集素(Hypsizygus marmoreus Lectin,简称HML).HML经PAGE显示单一条带,SDS-PAGE测得亚基相对分子质量为34.2 kD,SephadexG-100凝胶过滤测得相对分子质量为35 kD,中性糖含量为7.2%,含有17种氨基酸,IEF-PAGE测得其等电点为8.15.该凝集素能凝集多种动物红细胞和人的A、B、AB和O血型红细胞,对兔红细胞的凝集作用可被甘露糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺和岩藻糖所抑制.HML对热较敏感,经50℃处理10 min,凝集活性下降明显,但对酸碱具有一定的稳定性,在pH 5.0~8.0范围内较稳定.β-消去反应测得其糖和蛋白质的连接键为O-型糖肽键.
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