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超耐热酸性α-淀粉酶基因在多型汉逊酵母中表达及与在毕赤酵母中表达的比较研究

Comparison between the expression of extremely thermostable and acid-stable amylase gene in Hansenula polymorpha and that in Pichia pastoris

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摘要利用毕赤酵母的质粒载体pPIC9K将极端耐热古菌Pyrococcus furiosus的超耐热酸性α-淀粉酶 (Amy) 基因转化到多型汉逊酵母HP-6中,获得重组汉逊酵母.经过甲醇进行诱导,表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳,证明α-淀粉酶(Amy)在多型汉逊酵母中利用AOX1启动子和α-因子信号肽有效表达并分泌到胞外.该酶的最适反应温度为90～100℃,最适作用pH为4.0～5.0,较之重组毕赤酵母的最适作用pH还低0.5.此外与毕赤酵母的重组蛋白相比,重组汉逊酵母α-淀粉酶不仅菌株筛选简便、周期短,而且具有更容易筛选到高拷贝转化子以及适用于大规模工业发酵等优点.

作者郝帅 ^[1] 郭建强 ^[2] 李运敏 ^[3] 岳丽丽 ^[3] 矫庆华 ^[4] 学术成果认领

作者单位中国科学院微生物研究所,北京,100080;中国科学院研究生院,北京,100049 ^[1] 三元基因有限公司,北京,100083 ^[2] VA Medical Centre 111C5,Department of Medicine University of California at San Francico 4150 Clement Street,San Francisco,CA 94121,USA ^[3] 中国科学院微生物研究所,北京,100080 ^[4]

关键词 Pyrococcus furiosus AOX1启动子 MOX启动子 α-因子信号肽

医学主题词淀粉酶类(Amylases)毕赤酵母(Pichia)基因(Genes)研究(Research)质粒(Plasmids)

分类号 Q939.97（应用微生物学）

栏目名称

研究论文

DOI 10.3969/j.issn.1672-6472.2006.04.011

发布时间 2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家科技攻关计划（2001BA708B03-03）