换一批小麦根腐病菌索氏平脐蠕孢SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测技术研究
Quantitative detection of Bipolaris sorokiniana in winter wheat based on SYBR Green Ⅰ real-time PCR
摘要由索氏平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana引起的小麦根腐病,常和其他土传真菌病害混合发生,传统的症状鉴别方法很难区分,导致病害防控难度增加.为建立病菌实时荧光定量检测体系,根据ITS序列设计引物,筛选出1对特异性引物BS-F/R,扩增片段大小为280bp.以菌丝DNA为标准品构建实时荧光定量标准曲线,并对其灵敏度、特异性、可重复性进行评价.结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性好.构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,扩增效率良好.利用该定量检测体系,可以检测出田间小麦样品中52.8fg/μL的病菌DNA.
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关键词
土传病害菌丝DNAITS序列实时荧光定量PCR小麦根腐病菌定量检测soil-borne disease mycelium DNA ITS sequence real-time PCR Bipolaris sorokiniana quantitative detection
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DOI
10.13346/j.mycosystema.130075
发布时间
2014-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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