灵芝端粒解旋酶基因的克隆与生物学功能
Cloning and biological function of telomere-linked helicase gene in Ganoderma lingzhi
摘要端粒解旋酶(telomere-linked helicase,Tlh)在维持端粒长度和基因组稳定性中起关键作用.除其基础作用外,解旋酶还在涉及DNA/RNA代谢的细胞过程中担当重要的角色.本研究通过同源序列比对在灵芝中获得 Tlh 基因,分析发现 Tlh 基因编码 750 个氨基酸,其蛋白含有DEXHC-RecQ、DEAD和HELICc结构域,与担子菌中的Tlh蛋白保守性较高.进一步构建灵芝Tlh沉默菌株(Tlhi-9 和Tlhi-21),检测Tlh在灵芝中的生物学功能.结果显示,与野生型相比,Tlhi-9 和Tlhi-21 菌株菌丝生长减缓,菌落直径分别降低 23%和 24%,生物量分别降低 41%和 43%;相较野生型,Tlhi-9 和Tlhi-21 菌株中CMCase活性分别降低 39%和 43%,而木聚糖酶活性均降低 40%;Tlhi-9和Tlhi-21 菌株中胞内多糖含量较野生型分别降低 38%和 40%;Tlhi-9 和Tlhi-21 菌株中灵芝酸含量较野生型分别降低 51%和 56%.研究结果说明,Tlh基因参与调控灵芝生长、纤维素酶与木聚糖酶活性及次生代谢.
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