换一批金钗石斛多糖的酶解工艺优化及其抗氧化活性
Process optimization of Dendrobium nobile polysaccharide on enzymatic hydrolysis and its antioxidant activity
摘要采用α-半乳糖苷酶对金钗石斛多糖30％醇沉(30％为乙醇水溶液中乙醇的质量分数)组分(DNP-30)进行了酶解.以酶解产物(DNP-30E)对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率为指标,通过单因素和响应面实验确定了最佳酶解条件.采用FTIR、NMR、高效凝胶渗透色谱仪对DNP-30和DNP-30E 进行了表征.基于体外和细胞内抗氧化活性实验、建立十二烷基硫酸钠(SDS)刺激HaCaT细胞氧化应激模型,探究了 DNP-30和DNP-30E的抗氧化能力.结果表明,在α-半乳糖苷酶加酶量20U/mL、pH=7.0、酶解温度46 ℃、酶解时间11 h的最佳酶解条件下,DNP-30E对ABTS+自由基清除率平均值为85.62％.与DNP-30相比,DNP-30E还原糖含量由0.63％±0.35％升至48.66％±0.51％,重均相对分子质量由7.95×105 Da降至2083 Da.酶解过程造成多糖中的葡萄糖(1α→6)-甘露糖[Glu(1α→6)-Man]键发生断裂,并引起葡萄糖端基氢构型翻转.当多糖质量浓度为2.0 g/L时,DNP-30E提高了 ABTS+自由基、羟基自由基、超氧自由基清除率;当多糖质量浓度为5.0～10.0 g/L时,DNP-30E细胞毒性比DNP-30显著降低.多糖质量浓度为0.5 g/L时,DNP-30E组比DNP-30组的活性氧含量降低了 34.21％,丙二醛含量降低了 50.2％,超氧化物歧化酶活力提升了 84.17％,表现出更强的抗氧化能力.
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关键词
金钗石斛多糖α-半乳糖苷酶酶解工艺优化抗氧化活性HaCaT细胞中药现代化技术polysaccharide of Dendrobium nobileα-galactosidaseenzymatic hydrolysis process optimizationantioxidant activityHaCaT cellsmodernization technology of traditional Chinese medicines
分类号
R284（中药学）
栏目名称
DOI
10.13550/j.jxhg.20240230
发布时间
2025-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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