换一批
换一批重组AiiA蛋白可溶性表达及发酵条件优化
Soluble Expression and Fermentation Condition Optimization of Recombined AiiA Protein
摘要通过摇瓶培养确定重组工程菌E.coli BL21( DE3) -pET29a-aiiA表达AiiA蛋白可溶性表达的最优化条件,考察以牛肉膏蛋白胨为基础培养基添加不同种类的碳源、不同浓度的磷酸钾缓冲液(pH7.0)、微量元素、乙酸以及调整牛肉膏蛋白胨的比值对AiiA蛋白可溶性表达的影响,并用15 L发酵罐进行补料分批发酵,确定高密度发酵工艺条件.结果表明:优化发酵培养基为蔗糖10 g/L,牛肉膏7.8 g/L,蛋白胨31.2 g/L,NaCl 5 g/L,K2 HPO4·3H2O 14 g/L,KH2PO4 5.3 g/L,4 mL/L微量元素.优化后AiiA蛋白可溶性达4.31 mg/mL.在15 L发酵罐补料分批发酵培养中,诱导24 h时,发酵菌OD600达到18.5,可溶性蛋白表达量5.9 mg/mL,占AiiA总蛋白50.7％,实现了扩大培养.
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