换一批中性粒细胞胞外诱捕网放大脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应
Neutrophil extracellular traps enlarges the inflammatory response of alveolar macrophages induced by lipopolysaccharide
摘要目的 观察中性粒细胞胞外诱捕网 (NETs) 对脂多糖 (LPS) 诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的放大作用.方法 采用小鼠外周血中性粒细胞分离试剂盒分离提取C57BL/6小鼠外周血中性粒细胞.采用佛波酯 (PMA) (100nmol/L) 诱导中性粒细胞形成NETs, 采用荧光显微镜及扫描电子显微镜观察NETs.体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383, 分为⑴对照组:加入等体积PBS;⑵NETs组:加入制备好的 (1.7×106个/ml) NETs;⑶LPS组:加入1mg/L LPS;⑷LPS+NETs组:LPS联合NETs共刺激, 各组均刺激12h.采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测细胞上清液中白细胞介素-1β (IL-1β) 、肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 含量.结果 荧光显微镜下观察示对照组中性粒细胞核形态完整, 无DNA与NETs的胞外共定位网状结构, PMA刺激组可见DNA网状结构, 且与NETs共定位;扫描电子显微镜下也观察到中性粒细胞染色质呈网状结构释放至胞外, 提示PMA诱导NETs形成成功.采用LPS、NETs分别刺激肺泡巨噬细胞12h, 细胞上清液中的IL-1β、TNF-α含量均较对照组显著升高, LPS+NETs组上清液中的IL-1β含量较LPS组显著升高 (P＜0.05), 上清液中的TNF-α较LPS组相比差异无统计学意义 (P＞0.05).结论 NETs增加LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症因子释放, 提示NETs可以放大LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应.
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关键词
中性粒细胞胞外诱捕网肺泡巨噬细胞炎症反应白细胞介素-1β肿瘤坏死因子-αExtracellular trap net of neutrophilsAlveolar macrophagesInflammatory responseinterleukin-1βTumor necrosisfactor-α
医学主题词
粒细胞(Granulocytes)巨噬细胞, 肺泡(Macrophages, Alveolar)炎症(Inflammation)胞外诱捕网(Extracellular Traps)白细胞(Leukocytes)
分类号
R-332（实验医学、医学实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-2238.2019.01.008
发布时间
2019-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81460292,81871548）
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