换一批淫羊藿甙改善骨髓充质干细胞在防治股骨头上无菌化坏死作用的机制研究
Effects of icariin on the differentiation and proliferation of the canine bone marrow mesenchyme stem cell under the con-ditions of Osteonecrosis microenvironment
摘要目的 研究淫羊藿苷在骨坏死微环境中对犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响,佐证淫羊藿苷可以增强BMSCs治疗股骨头无菌性坏死的疗效.方法 12月龄清洁级健康犬,雌雄不限,体重约20Kg.利用液氮冷冻法制作犬股骨头坏死模型,造模后2周于髂嵴上穿刺抽取骨髓10 mL,利用犬单个核细胞分离液分离单核层细胞,常规传代培养犬BMSCs.同时处死实验犬,取出坏死的股骨头,无菌条件下切成小块,放入10％FBS的DMEM培养基中培养,每隔3天换液1次,并收集坏死骨培养液.取第3代细胞进行实验,更换含有5％坏死骨培养液的条件培养基,培养基中淫羊藿苷终浓度分别为2.58、4.18、6.77、10.95、17.72μg/mL.增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养第7、14 d测碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性,第8天进行ALP染色,第14 d进行茜素红染色及钙化结节计数.结果 原代培养细胞呈典型成纤维细胞样形态;坏死骨培养液可促进BMSCs增殖,淫羊藿苷可抑制BMSCs增殖,但能显著促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性及ALP染色阳性率,增加钙化结节数量.结论 以坏死骨培养液法模拟骨坏死微环境的方式可行,淫羊藿苷在骨坏死微环境中同样可促进犬BMSCs的成骨性分化,说明淫羊藿苷可能通过某种途径改善BMSCs治疗股骨头坏死的疗效.
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DOI
10.3969/j.issn.1006-2238.2022.10.002
发布时间
2023-02-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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