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兔角膜内皮细胞在持续中高度眼压下超微结构变化的分析

Analysis of ultrastructural changes of rabbit corneal endothelial cells under constant medium and high intraocular pressure

摘要目的 通过体外压力仿生培养兔角膜内皮细胞,观察持续的中高度压力对角膜内皮细胞的影响.方法 中高度压力仿生组将压力设为 30 mmHg,持续培养 24 h、48 h、72 h,正常压力仿生组将压力设为 15 mmHg,另设无压力组作为空白对照组,培养 24 h.采用免疫法鉴定原代角膜内皮细胞,倒置显微镜观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞活性,免疫荧光检测钠钾泵(Na+-K+-ATP酶)的表达,蛋白质印迹(WB)法检测兔角膜内皮细胞中B细胞淋巴瘤-2(BcL-2)和磷酸化蛋白 53(p53)的表达.结果 获取的所有细胞证实为原代兔角膜内皮细胞表型,无角膜上皮细胞及基质细胞污染,3 组细胞分别培养24h后,正常压力微环境培养的角膜内皮细胞排列紧密,六边形细胞居多,中高度压力组细胞生长状态尚可,六边形居多,细胞扁平,胞浆丰富,细胞排列疏松,但随着压力持续时间的延长,细胞活性明显下降;流式细胞术检测显示,3 组细胞培养24h后,细胞活性的比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光检测发现,中高度压力组细胞间连接较疏松,细胞膜Na+-K+-ATP酶的阳性表达明显弱于正常压力培养组,同时,WB法检测p53 和BcL-2 的表达发现,中高度压力组角膜内皮细胞中p53 的表达明显升高,同时,BcL-2 相应出现反应性上升的现象,3 组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 持续的中高度压力可致兔角膜内皮细胞活性和细胞膜Na+-K+-ATP酶活性下降,诱导角膜内皮细胞凋亡,具有一定的损伤性.

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DOI 10.3969/j.issn.1006-2238.2025.10.002
发布时间 2026-02-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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江西医药

江西医药

2025年60卷10期

876-879,886页

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