补肾化瘀祛湿法对兔膝骨关节炎beclin1、LC3调节作用的研究
Study on the Modulating Effect of the Method of Tonifying the Kidney, Removing Blood Stasis and Dispelling Dampness on Rabbit Knee Osteoarthritis Beclin 1 and LC3
摘要目的:探讨补肾活血汤联合丁苏桂热敷剂对兔膝骨关节炎自噬相关蛋白LC3、beclin1表达水平的影响.方法:将36只新西兰实验兔随机平均分为6组,分别为空白组、模型组、阳性药对照组、丁苏桂热敷剂组、补肾活血汤组、联合组.除空白组外,其余5组选用改良Hulth法造模.造模成功后分别干预6周,于实验兔的右膝关节软骨组织取材.膝关节组织病理变化选用HE染色,Mankin's评分;自噬相关蛋白选用Elisa法检测软骨组织中beclin1、LC3-Ⅱ浓度水平和Western Blot法检测软骨组织中beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的表达.结果:与空白组相比,模型组Mankin's评分显著升高,beclin1、LC3-Ⅱ浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin1/GAPDH蛋白表达水平显著降低(P<0.01).与模型组相比,阳性药对照组Mankin's评分显著降低,beclin1、LC3-Ⅱ浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin 1/GAPDH蛋白表达水平显著升高(P<0.01).且阳性药对照组相比,丁苏桂热敷剂组、补肾活血汤组、联合组Mankin's评分显著降低,beclin1、LC3-Ⅱ浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin 1/GAPDH蛋白表达水平显著升高(P<0.01).联合组在Mankin's评分,beclin1、LC3-Ⅱ浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin 1/GAPDH蛋白表达水平改善均优于丁苏桂热敷剂组、补肾活血汤组(P<0.05).结论:补肾活血汤内服联合丁苏桂热敷剂能显著增强兔KOA模型软骨组织中自噬相关蛋白beclin1、LC3的表达,增强膝骨关节炎软骨细胞自噬程度,进而起到了保护软骨的作用,对膝骨关节炎具有治疗作用.
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