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circRNA-PTPRM靶向miR-139-5p调控肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

circRNA-PTPRM targeting miR-139-5p regulates proliferation,migration,and invasion of liver cancer cells

摘要背景 抑制异常活化的信号通路,可有效抑制肿瘤细胞的生长和扩散,这为肝癌治疗提供了新的思路.目的 探讨circRNA-PTPRM对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制.方法 qRT-PCR检测正常肝细胞系HL-7702和肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Huh-7中PTPRM和miR-139-5p的表达水平;通过生物信息学和双荧光素酶检测实验验证PTPRM和miR-139-5p的靶向关系;MTT法检测肝癌细胞增殖水平;Transwell迁移及侵袭实验检测细胞横向迁移及侵袭能力,Western blot检测细胞增殖、侵袭和迁移中相关蛋白Cyclin-D1的表达.结果 与正常肝细胞HL-7702比较,肝癌细胞系HepG2、Hep3B和Huh-7中PTPRM表达水平升高(P<0.05),miR-139-5p表达水平降低(P<0.05).选取HepG2细胞系进行后续实验,生物信息学显示circRNA-PTPRM与miR-139-5p存在结合位点,双荧光素酶报告实验结果及PCR显示PTPRM靶向调控miR-139-5p表达.上调PTPRM表达可逆转miR-139-5p过表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05);过表达PTPRM可抑制miR-139-5p表达;沉默PTPRM可促进miR-139-5p表达,抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭以及细胞增殖特异性周期蛋白(Cyclin)-D1的表达(P<0.05).结论 沉默PTPRM可能促进miR-139-5p的表达上调,导致肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低.

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