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数字PCR应用于大规模呼吸系统疾病流行监测的可行性研究

Feasibility study on using digital PCR for large-scale detecting disease of respiratory system during the course of epidemic

摘要目的 探讨数字聚合酶链反应(dPCR)应用于大规模呼吸系统疾病流行监测的可行性.方法 利用核酸体外转录RNA标准物质制备标准品,分别绘制荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和dPCR方法的标准曲线,比较2种检测方法的线性范围,结合临床诊断结果,评价qPCR和dPCR方法的优劣.结果 qPCR检测基因1的最低检测限(LoD)值为17.10 copy/μL,基因2的LoD值为17.60 copy/μL,标准曲线R2 分别为0.960 7和0.958 1,dPCR检测基因1的LoD值为0.80 copy/μL,基因2的LoD值为0.40 copy/μL,R2 分别达到0.999 3和0.999 9.结论 应用dPCR方法检测病原微生物感染患者的样本,其LoD值高于qPCR方法20倍以上,且dPCR敏感性和特异性均优于qPCR.在进行大规模呼吸系统疾病流行监测的过程中,dPCR有望能够较qPCR更加准确有效地判定样本中病原微生物载量.

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