摘要目的 比较不同脂多糖(LPS)给药途径与剂量对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型的影响,建立兼具病理典型性与适当存活率的优化模型.方法 将2～3 d龄SD大鼠150只随机分为6组:对照组(腹腔注射无菌生理盐水)、腹腔注射LPS低剂量组(1 mg/kg)、腹腔注射LPS高剂量组(2 mg/kg)、口服LPS低剂量组(4 mg/kg)、口服LPS中剂量组(8 mg/kg)、口服LPS高剂量组(12 mg/kg),每组25只.对照组大鼠每日1次腹腔注射无菌生理盐水,持续3 d,进行母乳喂养;其余5组每日接受LPS给药(通过腹腔注射或经口灌胃的方式给予相应剂量的LPS,每日1次)、人工喂养及冷刺激与缺氧复合应激,持续3 d.评估6组大鼠存活率、一般状况(包括精神状态、活动度、腹胀程度、腹泻评分及总评分)、体重变化、肠道病理改变情况、肠组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)]水平及肠道紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin蛋白)表达水平和肠道通透性(血清FITC-dextran水平).绘制K-M生存曲线进行生存分析.结果 建模72 h,对照组存活25例,腹腔注射LPS低剂量组存活14例,腹腔注射LPS高剂量组存活11例,口服LPS低剂量组存活23例,口服LPS中剂量组存活20例,口服LPS高剂量组存活7例.K-M生存曲线结果显示,腹腔注射LPS低剂量组、腹腔注射LPS高剂量组、口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组生存曲线明显低于对照组(log-rank x2=14.58、21.88、5.56、34.72,均P＜0.05).与对照组相比,腹腔注射LPS低剂量组、腹腔注射LPS高剂量组、口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组72 h生存率明显降低(P＜0.05).与对照组比较,腹腔注射LPS低剂量组、腹腔注射LPS高剂量组、口服LPS低剂量组、口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组精神状态评分、活动度评分、腹胀程度评分、腹泻评分、总评分、肠组织病理评分及肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、TNF-α/IL-10、IL-1β/IL-10和血清FITC-dextran水平均明显升高,第4天体重、体重变化率及肠组织IL-10、Occludin蛋白、ZO-1蛋白水平均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与腹腔注射LPS高剂量组比较,口服LPS低剂量组和口服LPS中剂量组精神状态评分、活动度评分、腹胀程度评分、腹泻评分及总评分明显降低,腹腔注射LPS低剂量组、口服LPS低剂量组、口服LPS中剂量组和口服LPS高剂量组第4天体重及体重变化率均明显升高,腹腔注射LPS低剂量组、口服LPS低剂量组新生大鼠肠组织病理评分明显降低,口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组新生大鼠肠组织病理评分明显升高,口服LPS低剂量组、口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平及TNF-α/IL-10、IL-1β/IL-10降低,口服LPS低剂量组、口服LPS中剂量组肠组织IL-10水平升高,腹腔注射LPS低剂量组、口服LPS低剂量组新生大鼠肠组织Occludin、ZO-1蛋白水平升高,口服LPS高剂量组肠组织Occludin蛋白水平降低,口服LPS低剂量组、口服LPS中剂量组、口服LPS高剂量组血清FITC-dextran水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与口服LPS中剂量组比较,口服LPS高剂量组精神状态评分、活动度评分、腹胀程度评分、腹泻评分及总评分明显升高,口服LPS低剂量组精神状态评分、活动度评分、腹胀程度评分、腹泻评、总评分及肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、TNF-α/IL-10、IL-1β/IL-10明显降低,腹腔注射LPS低剂量组和口服LPS高剂量组第4天体重及体重变化率均明显降低,腹腔注射LPS低剂量组、口服LPS低剂量组新生大鼠肠组织病理评分均明显降低,腹腔注射LPS低剂量组、口服LPS高剂量组肠组织TNF-α/IL-10、IL-1β/IL-10升高,口服LPS低剂量组肠组织Occludin、ZO-1蛋白水平升高,腹腔注射LPS低剂量组肠组织Occludin蛋白水平及口服LPS高剂量组血清FITC-dextran水平升高,口服LPS低剂量组血清FITC-dextran水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).口服LPS中剂量组表现为典型的NEC大体改变,肠道节段性充血、水肿明显,散在坏死灶,肠壁增厚,部分肠段呈暗红色.结论 口服LPS 8 mg/(kg·d)联合复合应激可成功诱导新生大鼠NEC模型,该模型兼具典型病理特征、适度炎症反应和较高存活率,为NEC研究提供了优化的实验模型.