换一批正交设计优化玉米SSR-PCR反应体系的研究
Study on Optimization of SSR-PCR Reaction System on Maize by Orthogonal Design
摘要为建立适宜玉米SSR-PCR的反应体系和扩增程序,利用正交设计L16(45)表,对反应体系的模板DNA、dNTPs、Primers、Taq DNA聚合酶的浓度进行4因素4水平优化筛选和扩增程序的优化,确立了最优反应体系和扩增程序.即在10 μL体系中,模板DNA 20 ng,1×PCR buffer,dNTPs 62.5 pmol/μL,Primers0.25 pmol/μL,Taq DNA polymerase 0.5 U.反应程序为:94℃预变性5 min:94℃变性45 s,60℃退火45 s,72℃延伸1 min,32个循环;72℃延伸5 min,4℃保存.使用300对SSR引物对重组近交系的两亲本扩增,筛选出条带清晰,有差异的引物94对,用于基因连锁图谱构建和QTL定位.
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分类号
S5
栏目名称
DOI
10.3969/gab.028.000119
发布时间
2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
研究生创新科研项目（YJSCX2008-064HLJ）
黑龙江省教育厅科研项目（11521196）
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