换一批
换一批转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测
Specific PCR Validation of Transformation Event for Transgenic Soybean GTS40-3-2
摘要GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据己公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer 5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物进行了退火温度、特异性及扩增效率的PCR检测,结果显示,5对特异性引物均能够从GTS40-3-2中扩增出大小约279 bp、238 bp、470 bp、490 bp和257 bp的预期产物,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2转化事件.以转基因大豆GTS40-3-2含量为5%、2%、1%、0.5%和0.1%的标准品进行PCR灵敏度检测,结果表明5对引物的检测灵敏度均能达到0.1%.通过荧光定量PCR对5对特异性引物的Ct值与溶解曲线比较,最后选择出RRS2引物对为转基因大豆GTS40-3-2品系特异性检测的最适引物.本文结果将为我国未来转基因生物产品成分检测提供科学合理的实验参考.
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分类号
S5
DOI
10.3969/gab.029.001177
发布时间
2011-04-07
基金项目
现代农业产业技术体系建设专项资金
国家948项目
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