PLD途径合成的PA增强高表达转玉米C4型pepc 水稻悬浮细胞中PEPC酶活性
PA Produced by PLD Enhanced PEPC Enzyme Activity of Transgenic Rice Suspension Cell with Over-expressing Maize C4 Type pepc
摘要为了研究外源信号分子对高表达玉米C4型pepc酶活性的调节机制,本实验以高表达玉米C4型pepc水稻(PC)和原种水稻Kitaake (WT)的悬浮细胞系为材料,研究葡萄糖、胡蜂蜂毒肽(mastoparan, Mas)及其磷脂酸(phosphatidic acid, PA)的两个合成途径的专一性抑制剂(磷脂酶D (phospholipase D, PLD)的专一性抑制剂正丁醇和磷脂酶C (phospholipase C, PLC)的专一性抑制剂新霉素)对供试材料PEPC活性的影响.结果表明,3%葡萄糖处理0.5 h对WT的PEPC酶活性抑制最明显;相对于PC,则5%的葡萄糖处理5 h时,对其PEPC酶活性抑制的最明显.5 mmol/L的Mas对WT和PC悬浮细胞的PEPC酶活性分别抑制了约60%和40%.0.01 mmol/L、0.1 mmol/L和1 mmol/L新霉素处理对WT的PEPC酶活性影响不明显,且无时间效应;与WT相比较,不同浓度的新霉素均增强了PC的PEPC酶活性,其中0.1 mmol/L新霉素处理增加为对照的约7倍.正丁醇处理明显抑制了WT的PEPC酶活性,但不同浓度处理之间却没有显著差异;而对于PC,0.02%、0.04%正丁醇处理使得PEPC酶活性显著下降,且比WT的更显著.同时0.04%的正丁醇的抑制效应具有明显的时间效应.以上结果表明,对PC的PEPC酶活性的调节主要依赖于由PLD途径产生的PA的参与.
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