换一批
换一批水稻Os着-c op 1基因的原核表达及多克隆抗体制备
Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation of Osε-c op 1 in Rice (Oryz a s ativ a L.)
摘要 着-COP蛋白是真核生物分泌途径中COP玉有被小泡的一个亚基。本研究利用PCR技术扩增水稻着-c op基因(Os着-c op 1)的ORF(开放阅读框)，并克隆到原核表达载体pET-23d上，将表达载体pET-Os着-cop1转入大肠杆菌BL21(DE3)，以1.0 mmol/L的IPTG (isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导表达重组蛋白，然后以重组蛋白作为抗原免疫家兔，制备多克隆抗体。SDS-PAGE电泳分析结果表明，成功诱导表达了分子量约为35 kD的重组蛋白，Western blot检测表明，免疫家兔的抗血清与水稻幼穗总蛋白杂交信号较好。Os着-COP1抗体的制备有助于研究该基因及COPI小泡在水稻中的功能。
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DOI
10.3969/gab.032.000497
发布时间
2013-09-06
基金项目
广东省自然科学基金项目
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