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竹黄菌原生质体的制备与再生分析

Analysis of the Preparation and Regeneration of Protoplasts from Shiraia bambusicola P.Hennings

导出 LinkOut 学术成果认领

摘要为了提高竹黄菌(Shiraia bambusicola P.Hennings)中原生质体用于遗传转化时的转化效率,研究竹黄菌原生质体制备及再生的最佳条件,建立竹黄菌原生质体的高效遗传转化体系.本研究以竹黄菌为材料,采用正交试验分析方法,对影响竹黄菌原生质体制备及再生的主要因素,不同酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂及菌龄、不同再生培养基等进行了系统的研究.结果表明,以0.6 mol/L NaCl为稳渗剂,用组合酶(质量分数1％裂解酶和质量分数1.5％崩溃酶按4:6体积比混合)在33℃条件下对菌龄为6d的菌丝体酶解2h,原生质体产量最高,达到10.57×106个/mL;以0.6 mol/L蔗糖为稳渗剂,用组合酶(质量分数1％裂解酶和质量分数1.5％崩溃酶按4:6体积比混合)在29℃条件下对菌龄为4d的菌丝体酶解2h,原生质体再生率最高,为0.293％;最适合竹黄菌原生质体再生的培养基是TB3再生培养基.

作者魏洪美 ^[1] 任锡毅 ^[2] 杨兵 ^[3] 黄青青 ^[1] 刘永翔 ^[2] 乙引 ^[4] 学术成果认领

作者单位贵州师范大学,贵阳,550001;贵州省农业生物技术重点实验室,贵阳,550006 ^[1] 贵州省农业生物技术重点实验室,贵阳,550006;贵州省生物技术研究所,贵阳,550006 ^[2] 贵州省农业生物技术重点实验室,贵阳,550006 ^[3] 贵州师范大学,贵阳,550001 ^[4]

关键词竹黄菌原生质体制备原生质体再生正交试验 Shiraia bambusicola P.Hennings Preparation of protoplast Regeneration of protoplast Orthogonal test

栏目名称

微生物组学与发酵工程

DOI 10.13417/j.gab.035.000918

发布时间 2016-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（NSFC31460199）贵州省科技合作计划项目