棉铃虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及表达分析
Cloning and Expression Analysis of Serine Protease Inhibitor Encoding Genes from Helicoverpa armigera
摘要本研究对棉铃虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Helicoverpa armigera serine protease inhibitor,Haspi)基因的基本特征、分布情况及功能进行了初步探究.通过与已报道的家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因同源比对,利用RT-PCR技术成功克隆到3条与家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因相似性高的Haspi基因,分别命名为:Haspi-5、Haspi-6和Haspi-1O.实时定量PCR结果表明3个基因在棉铃虫各组织部位均有转录,但在不同组织部位处的表达水平差异显著.Haspi-5基因在表皮中的表达水平最高;Haspi-6基因在头部的转录水平远远高于其他组织部位;Haspi-1O基因在前肠中表达水平最高,中肠的转录水平也相比其他组织较高.构建表达Hasp i-5、Haspi-6基因的dsRNA的载体,用表达dsRNA的HT115菌液喂食,其中Hasp i-5基因在棉铃虫的转录水平明显下降,约降低了6.5倍,而Hasp i-6基因转录水平略有下降但并不明显,约降低了1.2倍,但是没有观察到明显的表型变化.上述研究为Haspi基因的功能及棉铃虫防治研究提供科学依据.
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