酥瓜(Cucumis melo var.conomon Group)基因组DNA提取及RAPD分子标记反应体系的建立
Extraction of Genomic DNA and Construction of RAPD Molecular Marker Reaction System in Cucumis melo var.conomon Group
摘要本研究以改良的CTAB法提取酥瓜基因组DNA,利用正交设计L16(45),对酥瓜RAPD-PCR反应体系的5个影响因素(引物,dNTPs,TaqDNA聚合酶,Mg2+和模板DNA)在4个水平上进行优化试验,并在30~50℃范围内摸索退火温度,建立适合酥瓜RAPD-PCR反应体系.研究表明,在25 μL反应体系中,含有引物0.8μmol/L、dNTPs 0.3 μmol/L、Taq DNA聚合酶1U、Mg2+ 0.5 mmol/L、DNA模板30 ng为最佳反应体系,RAPD-PCR扩增程序中最佳退火温度为37.6℃.该体系有助于酥瓜种质资源的遗传多样性分析评价.
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