换一批
换一批基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑
CRISPR/Cas9 System-Based Editing of dsRNA-binding Protein A tHyl1
摘要RNA沉默是植物重要的抗病毒防御机制,双链RNA结合蛋白(dsRNA-binding proteins,DRB)是RNA沉默信号途径中的关键蛋白.DRB1/HYL1是拟南芥基因组编码的7个DRBs之一,本研究将人工合成含2个A tHyl1靶位点序列的串联tRNA-gRNA片段导入CRISPR/Cas9表达载体中,构建双靶点的CRISPR/Cas9表达载体,通过转化拟南芥dcl2drb4双突变体获得36株转基因阳性植株.对经测序分析可能己发生基因编辑的3株进行单克隆测序分析,测序结果表明均己发生编辑,获得了A tHyl1基因被编辑的拟南芥dcl2drb4突变体T1代转基因植物.该结果为研究AtHyl1是否参与DCLA介导的抗病毒RNA沉默通路提供了帮助.
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