换一批尼罗罗非鱼Crtam基因的克隆鉴定与mRNA表达分析
Identification and mRNA Expression Analysis of Crtam Gene in Nile tilapia
摘要Crtam作为NK细胞和CD8+T细胞的活化标志物,已被证实在哺乳动物中参与多种免疫途径,但在罗非鱼中的作用未知.本研究克隆鉴定了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) Crtam cDNA全长(命名为On-Cr-tam),对该基因进行生物信息学分析,并运用荧光定量PCR对无乳链球菌刺激后On-Crtam mRNA在各免疫组织及器官中的表达模式进行了研究.结果 显示,On-Crtam基因CDS区为1335 bp,编码444个氨基酸,理论分子质量为110.15 kD,等电点为5.01.On-Crtam与奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)相似性最高(98.65％),与鱼类的同源性均在90％以上,表明Crtam在鱼类进化过程中较保守,但与其它物种同源性较低,在不同物种之间可能具有一定差异性.On-Crtam在健康尼罗罗非鱼各组织及器官中均有表达,在肝脏中表达量最高,其次是肌肉,胸腺,在脑中表达量最低.经poly I∶C病毒类似物和灭活无乳链球菌刺激后,On-Crtam的表达量在肝脏、头肾和皮肤等免疫组织及器官中都表现为极显著上调.这表明On-Crtam基因可能在无乳链球菌等病原入侵宿主过程中发挥重要作用,但其作用机制尚需进一步研究阐明.
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