基因原位回补技术及其在囊状匍柄霉中的应用
Gene in situ Complementation Technique and Its Application in Stemphylium vesicarium
摘要囊状匍柄霉(Stemphylium vesicarium)是无性态真菌中的重要类群,在世界范围内广泛存在,可危害多种作物,造成严重经济损失.前期研究发现,一种主要协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily,MFS)基因SvMFS1 敲除后,突变株表型变化明显,载体回补后表型却并未完全恢复.本研究基于Split-marker技术建立了敲除基因原位回补技术,通过比较载体回补转化子和原位回补转化子的表型、目的基因表达量、致病性及毒素Altersolanol A产量,发现原位回补是一种优于载体回补的基因功能研究技术.该方法将敲除基因重新重组至染色体原来的位置,能更好地回补敲除突变体丧失的表型,弥补了载体回补在丝状真菌功能基因研究中的不足,为敲除基因回补提供了一种新的方法.
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