摘要本研究旨在探讨吡非尼酮(pirfenidone,PFD)能否通过降低乳腺癌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的沉积,从而改善其免疫微环境.本研究构建了 4T1 乳腺癌模型,并随机将其分为模型对照组(PBS灌胃处理)和PFD治疗组(PFD灌胃治疗).采用马松染色和天狼星红染色检测肿瘤纤维化程度,用原子力显微镜检测肿瘤组织硬度,用免疫荧光染色检测肿瘤组织中CD8+T细胞的浸润以及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和胶原蛋白的表达情况.在转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)将成纤维细胞诱导为癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)的过程中,同时加入PFD处理细胞48 h,用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测CAFs经典标志物α-肌动蛋白-2(actin alpha 2,ACTA2)、成纤维细胞特异性蛋白(fibroblast specific protein,FSP)、血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,THBS-1)的表达情况,同时采用免疫荧光检测成纤维细胞中α-SMA的表达情况.结果显示,在动物实验中,相较于模型对照组,PFD治疗组中的胶原纤维沉积显著减少,组织硬度降低,CD8+T细胞浸润明显增加,α-SMA和胶原蛋白的表达也显著下降.在细胞实验中,PFD能明显抑制TGF-β刺激成纤维细胞的ACTA2、FSP和THBS-1基因表达水平的上升,降低细胞中α-SMA的表达.因此,PFD能抑制CAFs的活性,降低乳腺癌ECM的沉积及肿瘤组织的硬度,增加CD8+T细胞的浸润,改善乳腺癌的免疫微环境,表明PFD具有作为免疫治疗[如免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)]辅助用药的潜能.