白纹伊蚊CAP蛋白超家族分析及基因表达模式研究
Analysis of the CAP Protein Superfamily and Gene Expression Patterns in Aedes albopictus
摘要通过系统鉴定与表征中国重要虫媒病毒媒介——白纹伊蚊(Aedes albopictus)中的富含半胱氨酸的分泌蛋白、抗原 5和致病相关蛋白(cysteine-rich secretory proteins,antigen 5,and pathogenesis-related protein 1,CAP)蛋白超家族,明确该蛋白家族在白纹伊蚊中的成员组成与基本特征,为揭示其在吸血行为及病原体传播中的作用奠定基础.本研究通过分析白纹伊蚊参考基因组,鉴定得到CAP超家族成员,分析其系统进化关系、染色体定位和基因结构等特征.利用RT-qPCR分析该家族成员在雌蚊吸血前后,以及雌蚊不同组织之间的表达差异.本研究在白纹伊蚊中共鉴定出 11 个新的CAP家族基因,以及Alb-AG5-1~Alb-AG5-4等4 个已知成员蛋白基因.研究表明,这15 个基因分布在除线粒体DNA外的所有染色体上,其与脊椎动物富含半胱氨酸的分泌蛋白(cysteine-rich secretory proteins,CRISPs)具有相似的理化性质,但在序列和结构上存在显著差异.系统进化分析表明串联重复是其在白纹伊蚊中进化的主要驱动力.RT-qPCR结果显示,除gene 2 和gene 3 外,其余基因在血餐与蔗糖喂养的雌蚊中均呈现差异表达,其中Alb-AG5-1~Alb-AG5-4在雌蚊唾液腺中特异性高表达,gene 6 和gene 11在雌蚊唾液腺中高表达.白纹伊蚊CAP蛋白家族成员的序列和结构特征与脊椎动物CAP蛋白的不同,其缺失C端结构域,该结构域的缺失可能并不影响CAP蛋白核心功能的发挥;而致病相关蛋白 1(pathogenesis-related protein 1,PR-1)结构域则被预测为直接参与功能执行的关键区域.基于上述发现,进一步筛选出 6 个可能具有重要生物学功能的蛋白,分别为gene 6、gene 11 编码的蛋白以及Alb-AG5-1~Alb-AG5-4.
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