摘要目的 探究磷酸弗林酸性簇分选蛋白 2(PACS-2)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥大的影响及其机制.方法 剪取并消化出生 1～2d的SD 大鼠乳鼠的心脏组织,采用差速贴壁法获取乳鼠心肌细胞(NRC-Ms),原代培养 24 h.以浓度为 1.5 μmol/L的 AngⅡ处理 NRCMs 0、3、6、12、24 h,采用 Western blot方法检测细胞中 FUN14 域蛋白 1(FUNDC1)、PACS-2、三磷酸肌醇受体蛋白(IP3R)的表达水平,采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)方法检测细胞中心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA 的表达水平.将 NRCMs分为 A～C组,A组使用无血清培养基培养,B、C组分别转染 si-NC和 si-PACS-2,采用 Western blot方法检测各组细胞中PACS-2 蛋白的表达水平.将NRCMs分为D～G组,D组使用无血清培养基培养,E组以浓度 0.15 μmol/L的 AngⅡ培养,F、G组分别转染 si-NC、si-PACS-2 后再以浓度 0.15 μmol/L的 AngⅡ培养,采用 TRITC-鬼笔环肽染色技术检测各组心肌细胞表面积,RT-qPCR检测各组细胞ANP、BNP、β-MHC mRNA的表达水平,以 Fluo-4,AM探针检测各组细胞胞质Ca2+的水平.将 NRCMs分为 H～K组,H 组使用无血清培养基培养,I、J 组分别转染si-NC、si-PACS-2,K组转染 si-PACS-2 并且以浓度 1 μmol/L的钙调蛋白(CaM)拮抗剂处理后,采用 RT-qPCR 方法检测各组细胞ANP、BNP、β-MHC mRNA的表达水平.结果 以浓度 1.5 μmol/L的AngⅡ处理NRCMs 0、3、6、12、24 h,NRCMs中ANP、BNP、β-MHC mRNA的表达水平呈时间依赖性上调(F=25.73～58.30,P＜0.05),并且处理第 24 小时时相较于第 0 小时时均显著上调(t=5.35～37.50,P＜0.05).以浓度 1.5 μmol/L的 AngⅡ处理 NRCMs 0、3、6、12、24 h,NRCMs 中 IP3R、PACS-2 以及 FUNDC1 蛋白的表达水平均呈时间依赖性下调(F= 5.37～9.07,P＜0.05),并且处理第 24 小时时相较于第 0 小时时显著下调(t=6.55～7.42,P＜0.05).与B组相比,C组 NRCMs中PACS-2 蛋白的表达水平显著下调(t=5.92,P＜0.05).与 F组相比,G组 NRCMs 中心肌细胞表面积增大,ANP、BNP、β-MHC mRNA的表达水平及胞质Ca2+水平均上调(t=3.50～26.60,P＜0.05).与J 组相比,K组 NRCMs 中ANP、BNP、β-MHC mRNA 表达水平均显著下调(t=3.27～5.13,P＜0.05).结论 敲低PACS-2 可增加NRCMs中胞质Ca2+水平,并且可能以Ca2+-CaM依赖的方式加重AngⅡ诱导的心肌肥大的发生.