黄芩素对Naïve CD4+T细胞向Th1和Treg细胞分化的影响
Effect of baicalein on the differentiation of Na?ve CD4+T cells into Th1 cells and Treg cells
摘要目的 探讨黄芩素对Na?ve CD4+T细胞向Th1和Treg细胞分化的影响.方法 从6~8周龄的BALB/c雄性小鼠脾脏中分选出Na?ve CD4+T细胞,并将其分为A~F组.A组细胞接种在包被有抗小鼠CD3抗体的孔板中,在含抗小鼠CD28抗体的培养基中培养72 h;B组细胞在A组基础上再加入白细胞介素-2(IL-2)、IL-12和抗小鼠IL-4抗体;C组细胞在B组的基础上再加入黄芩素.D组细胞的培养体系与 A组相同;E组细胞在D组的基础上再加入IL-2和转化生长因子-β(TGF-β);F组细胞在E组的基础上再加入黄芩素.通过流式细胞术检测A~C组中Th1细胞的比例和D~F组中Treg细胞的比例;通过RT-qPCR检测A~C组细胞中T盒子转录因子(T-bet)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相对表达水平和D~F组中叉头框蛋白P3(Foxp3)和IL-10的相对表达水平;通过免疫荧光染色检测A~C组中Th1细胞阳性率和D~F组中Treg细胞阳性率.结果 流式细胞术检测结果显示,C组Th1细胞比例显著低于B组(F=46.91,q=7.95,P<0.05),F组Treg细胞比例显著高于 E 组(F=145.20,q=8.64,P<0.05).RT-qPCR 检测结果显示,C 组细胞中 T-bet、IFN-γ、TNF-α 的相对表达水平显著低于B组(F=15.77~862.50,q=7.05~26.34,P<0.05),F组细胞中Foxp3和IL-10的相对表达水平显著高于 E组(F=38.25、49.24,q=4.65、7.64,P<0.05).免疫荧光结果显示,C组Th1细胞阳性率显著低于B组(F=11.64,q=4.50,P<0.05),F 组 Treg 细胞阳性率显著高于 E 组(F=20.31,q=4.64,P<0.05).结论 黄芩素对Na?ve CD4+T细胞向Th1细胞分化具有抑制作用,对Na?ve CD4+T细胞向Treg细胞分化具有促进作用.
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