通关藤苷G对胃癌细胞增殖、转移和凋亡的影响及其机制
Effects of Tenacissoside G on the proliferation,migration,invasion,and apoptosis of gastric cancer cells and its mechanism
摘要目的 探究通关藤苷G对胃癌细胞增殖、转移和凋亡的影响及其具体机制.方法 将人胃癌细胞系MGC803细胞随机分为A~D组,A组细胞正常培养,不做任何干预;B组细胞中加入通关藤苷G处理;C组细胞中加入通关藤苷G处理,同时加入腺相关病毒空载体(AAV-NC)进行感染;D组细胞中加入通关藤苷G,同时加入携带Ras同源基因家族成员A(RhoA)基因的过表达AAV载体进行感染.通过MTT法、细胞划痕实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测各组细胞的细胞活力、迁移率、侵袭数目和凋亡率.将SPF级6周龄雄性BALB/c-nu裸鼠分为Ⅰ~Ⅳ组,将MGC803细胞接种于每只裸鼠右腋部皮下,Ⅱ组裸鼠每隔1 d腹腔注射通关藤苷G-生理盐水溶液;Ⅲ和Ⅳ组裸鼠每隔1 d腹腔注射通关藤苷G-生理盐水溶液,同时分别通过尾静脉注射AAV-NC和AAV-RhoA;Ⅰ组裸鼠每隔1 d通过腹腔和尾静脉注射等剂量生理盐水.于造模第21天时分离各组裸鼠肿瘤组织,通过免疫组化和TUNEL染色分别检测各组裸鼠肿瘤组织中PCNA和TUNEL阳性细胞的比例.通过蛋白免疫印迹(WB)实验检测各组细胞及裸鼠肿瘤组织中RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路相关蛋白表达水平.结果 与 A组相比,B组细胞的细胞活力、迁移率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1和ROCK2蛋白相对表达水平均显著降低,凋亡率显著升高;与 C组相比,D组细胞的细胞活力、迁移率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1和ROCK2蛋白相对表达水平均显著升高,凋亡率显著降低(F=49.06~968.01,q=11.25~54.95,P<0.05).与 Ⅰ组相比,Ⅱ组裸鼠肿瘤组织中PCNA阳性细胞比例以及RhoA、ROCK1和ROCK2蛋白的相对表达水平显著降低,TUNEL阳性细胞比例显著升高;与Ⅲ组相比,Ⅳ组裸鼠肿瘤组织中PCNA阳性细胞比例以及RhoA、ROCK1和ROCK2蛋白相对表达水平显著升高,TUNEL阳性细胞比例显著降低(F=47.20~397.34,q=11.78~34.59,P<0.05).结论 通关藤苷G可能通过下调RhoA/ROCK信号通路相关蛋白的表达,抑制胃癌细胞的生长和转移并促进其凋亡,从而发挥抗胃癌作用.
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