换一批斜纹夜蛾视黄酸结合蛋白(Slcrabp)基因的克隆、表达及功能
The cloning, expression and functional study on cellular retinoic acid binding protein (Slcrabp) in Spodoptera litura
摘要视黄酸结合蛋白(Cellular retinoic acid binding protein,CRABP)属于胞内脂质结合蛋白超基因家族,参与了许多生理活动,如细胞分化、组织重建和信号转导等,但其在昆虫中肠的作用尚不明确.研究从斜纹夜蛾Spodoptera litura中肠基因表达序列标签(EST)文库中克隆获得一个编码Slcrabp的全长cDNA,该cDNA由396个核苷酸组成,编码132个氨基酸.预测CRABP蛋白质的空间结构与脂肪酸结合蛋白非常相似,含一个由10个反平行的β折叠和2个α螺旋形成的配体结合中心结构域.SlCRABP基因具有4个外显子,与脊椎动物crabp基因类似.RT-PCR检测表明,在转录水平上,Slcrabp在6龄幼虫中肠的各个时期均有较高表达.Western blot分析结果显示,SlCRABP蛋白分布广泛,在中肠、脂肪体、精巢等组织上大量表达.在中肠,其表达峰值出现在预蛹期.利用荧光标记物质8-苯胺基-1-萘磺酸(1,8-ANS)分析了重组SlCRABP蛋白与不同底物的亲和力,发现SlCRABP与不饱和长链脂肪酸有较高结合活性,如花生四烯酸钠、亚麻酸、油酸钠和油酸,但与视黄酸、视黄醇的结合力却很弱或几乎不结合,暗示斜纹夜蛾SlCRABP功能与同家族脂肪酸结合蛋白(FABP)性质相似.对6龄幼虫进行饥饿处理,结果显示经过经24 h和48 h饥饿处理后,虫体中肠SlCRABP蛋白质的表达量有显著上升,暗示SlCRABP可能参与了斜纹夜蛾体内脂类的转运过程.
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关键词
视黄酸结合蛋白中肠脂肪酸视黄酸斜纹夜蛾Cellular retinoic acid binding protein (CRABP)midgutfatty acidretinoic acidSpodoptera litura
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-0858.2017.03.2
发布时间
2017-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31330071）
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