蜂巢小甲虫OBP4的克隆及表达谱分析

Cloning and expression profiling of OBP4 gene in Aethina tumida(Coleoptera:Nitidulidae)

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摘要本研究克隆获得了一个新的蜂巢小甲虫Aethina tumida的气味结合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)基因,并对其序列特征、表达情况、系统发育进行研究.该蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因命名为AtumOBP4(GenBank登录号:ON813082),开放阅读框全长465 bp,编码154个氨基酸,预测其分子量大小为17.4 kDa,理论等电点为5.07.N末端有23个氨基酸组成的信号肽,具有6个保守的半胱氨酸位点,属于Classical OBP亚家族,系统进化树分析表明其与黄粉虫Tenebrio molitor OBP8亲缘关系最近.qRT-PCR结果显示AtumOBP4在雄性成虫中表达量显著高于雌性成虫且在头部(包含触角)特异性高表达,羽化后第7天达到最高值.推测AtumOBP4在蜂巢小甲虫嗅觉识别一般气味或性信息素过程中发挥重要作用.此外,成功构建了 pET32a(+)/AtumOBP4重组表达载体并通过原核表达获得了重组蛋白,为后期深入研究AtumOBP4蛋白功能奠定了基础,也为进一步研究OBP家族基因在蜂巢小甲虫寻找寄主蜂箱的嗅觉机制中提供了丰富的理论依据.