换一批
换一批基于RPA-CRISPR/Cas12a的美国白蛾可视化快速检测新方法
New and rapid visual detection assay for Hyphantria cunea Drury based on recombinase polymerase amplification and CRISPR/Cas12a
摘要美国白蛾Hyphantria cunea Drury是我国重要林业害虫,寄主植物众多且分布范围广泛.本试验基于重组酶聚合酶扩增(RPA)和CRISPR检测技术,构建美国白蛾RPA-CRISPR/Cas12a分子检测体系.根据NCBI数据库中的美国白蛾及近缘种、近似种线粒体CO Ⅰ基因片段信息以及昆虫样本CO I基因测序比对结果为模板,设计美国白蛾特异性RPA引物和CrRNA,通过RPA扩增目标序列,结合CRISPR检测技术并对反应条件进行优化,最终该体系灵敏度可检测的最低限度1.0×10-1 ng/μL,较RPA结合普通凝胶电泳提高了100倍,检测体系在30 min内即可实现对害虫的现场快速、可视化、精准鉴定.为美国白蛾现场检测提供理论和实践依据,有助于保护森林资源和生态环境的安全.
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栏目名称
害虫检验检疫
DOI
10.3969/j.issn.1674-0858.2024.05.04
发布时间
2024-10-12
基金项目
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费项目
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