草地贪夜蛾钙粘蛋白重复区片段的克隆表达及时空分析
Cloning,expression and temporal analysis of Cadherin in Spodoptera frugiperda(Lepidoptera:Noctuidae)
摘要为探明钙粘蛋白在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda中不同发育阶段、不同组织中的表达水平,进一步探索草地贪夜蛾钙粘蛋白作为 Cry 毒蛋白受体的功能性作用,本研究克隆并原核表达了草地贪夜蛾钙粘蛋白(Cadherin)SfCR10-12 片段,以及 SfCR10,SfCR11,SfCR12 3 个分段重复区片段,并对其时空表达模式进行了分析.结果表明:(1)草地贪夜蛾与甜菜夜蛾 Spodoptera exigua 钙粘蛋白序列高度相似达 80.46%.(2)获得的SfCR10-12 序列(GenBank 登录号:OP547784)长度为 933 bp,开放阅读框 810 bp,编码 268 个氨基酸.(3)SfCR10-12 基因在不同发育阶段均有表达,在 5 龄和 6 龄幼虫中表达量最高,此外在草地贪夜蛾中肠部位有一定的表达,但是在头部和体壁表达量较低.(4)经原核表达和纯化后获得了分子大小约为 34 kDa、9.57 kDa、14.11 kDa和 11.06 kDa的SfCR10-12、SfCR10、SfCR11和SfCR12蛋白片段.本研究结果为深入研究草地贪夜蛾钙粘蛋白不同重复区介导Bt Cry毒素对草地贪夜蛾的作用机制提供了基础.
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