一株对草地贪夜蛾具有胃毒活性的克雷伯氏菌分离及全基因组分析
Isolation and whole genome analysis of a strain of Klebsiella pneumoniae with oral insecticidal activity against Spodoptera frugiperda(Lepidoptera:Noctuidae)
摘要本研究从田间采集的菜青虫Pieris rapae L.中肠分离获得可培养的、菌落形态有显著差异的细菌菌落53个.将这些菌落接种至新鲜的LB培养基中培养3 d后,用于浸泡人工饲料并饲喂草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Smith 2龄幼虫,其中9株对草地贪夜蛾幼虫展现出一定的胃毒活性.针对杀虫活性最高的一株——克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae A7株进行了进一步的检测,发现其在培养后1 d、2 d和3 d后对草地贪夜蛾2龄幼虫处理96 h的致死率分别为26.39%±11.98%、8.33%±3.73%和56.25%±10.26%,均显著高于对照组试虫的死亡率(P<0.05).全基因组测序的结果表明,A7基因组总长度为8.55 Mb,GC含量51.78%,可编码8 148个基因,另含有3个质粒,大小分别为190 495 bp、89 806 bp和77 436 bp.进一步的分析结果表明,A7株编码的748种基因中,有214种毒力基因的检出率在70%以上,306种毒力基因的检出率低于50%,其余228种毒力基因的检出率在50%~70%之间;进一步利用VFDB数据库对214种毒力基因检出率在70%以上的基因进行注释,分别注释到13类毒力相关基因.可以观察到A7在16S rDNA系统发育树上与其他克雷伯氏菌属Klebsiella sp.的亲缘关系.本研究报道了一种对草地贪夜蛾幼虫具有杀虫活性的克雷伯氏菌,结合基因组学的分析,为草地贪夜蛾的生物防治提供了依据.
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